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琼脂糖凝胶配置超详细,看这一篇就够了
1、选择锥形瓶:用于制备胶液的锥形瓶体积应为胶液体积的2-4倍,以确保有足够的空间进行搅拌和加热。称量琼脂糖:根据所需浓度(本例为1%),准确称量琼脂糖粉末。注意边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。记录重量:记录锥形瓶和溶液的总重量,以便后续计算蒸发液体量。
2、配置1%浓度琼脂糖凝胶的详细步骤如下: 准备工具与材料 选择体积为胶液24倍的锥形瓶,确保溶液充分搅拌。 准备1×TBE缓冲液和1%琼脂糖,按重量称量,并细心记录,确保准确无误。 加热与溶解 将琼脂糖缓缓倒入缓冲液中,边加边搅拌,避免颗粒聚集。 将混合液放入微波炉,高火加热30秒。
3、首先,选择锥形瓶的体积应为所需胶液体积的2到4倍。在缓冲液中加入琼脂糖时,要边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。测量瓶体与溶液的总重量。接着,使用微波炉以高火加热30秒。加热时间要根据配制的溶液体积调整,考虑微波炉、瓶体大小和琼脂糖浓度的因素。充分摇匀琼脂糖溶液。
手把手教学——琼脂糖凝胶电泳的实验步骤及常见问题分析
设定凝胶运行的时间和电压。一般调节电压至4-5V/cm,电泳时间30-60分钟,具体根据凝胶比例和片段大小进行调整。例如,常用电压为120V,电泳时间为35分钟。电泳结束后,拔掉电源,取出凝胶进行观察。常见问题分析:加样孔有荧光 原因:提DNA时有蛋白质残留,这些蛋白质在电泳过程中与DNA一起被染色,导致加样孔出现荧光。
实验步骤: 配制凝胶:根据DNA片段大小选择适当浓度的琼脂糖,配制胶液,并加入Gelred染料。将配制好的胶液倒入模具中,等待其凝固。 准备样品:将待检测的DNA样品与含溴酚蓝的loading buffer混合均匀。 设置电泳槽:将凝固好的胶块放入电泳槽中,确保加样孔位于负电极一侧。
浇灌凝胶:将温热的琼脂糖溶液浇灌到模具中,检查梳齿下或梳齿间无气泡。制备低浓度琼脂糖凝胶时,可先倒一个支持胶。凝胶凝结:让凝胶溶液完全凝结,室温下需30~45min。加少量电泳缓冲液于凝胶顶部,小心拔出梳子,将凝胶安放到电泳槽内。加入电泳缓冲液:向电泳槽加入电泳缓冲液,刚好没过凝胶约1mm。
琼脂糖凝胶电泳实验技巧及异常分析实验技巧 胶液的制备 材料准备:称取适量的琼脂糖(如0.4g),置于锥形瓶中。溶液配制:加入适量的TBE缓冲液(如50ml 0.5×TBE),确保总液体量不超过锥瓶的50%容量。加热溶解:放入微波炉加热,直至琼脂糖全部熔化。
说一下植筋胶施工方法谁懂?
植筋胶配胶过程的施工方法主要包括以下步骤:配胶:操作:首先,需要将YJS建筑结构胶配胶过程的甲、乙两组份分别进行充分搅拌,确保各组份均匀。然后,按照规定的比例将甲、乙两组份混合在一起,再次进行搅拌均匀,直至颜色一致且无气泡产生,此时即可使用。注意事项:配胶过程中应注意比例准确,搅拌充分,避免产生气泡,影响胶的性能。
使用方法 弹线定位:根据设计图纸,标注出植筋位置。经质检部门验收,位置符合设计要求后,方可进行下一步。钻孔:使用冲击钻钻孔,钻头直径应比钢筋直径大4~8mm。钻孔深度不小于20d(d为钢筋直径),并确保钻头与承台保持垂直。洗孔:用不掉毛的毛刷伸至孔底,反复抽动带出灰粉、灰渣。
植筋胶的使用方法主要包括以下步骤:准备工作:清洁基面:确保混凝土表面干净、无油污、无灰尘和其配胶过程他杂质。可以使用钢丝刷或高压水枪进行清洁。钻孔:根据钢筋的直径和所需的锚固深度,使用电钻在混凝土上钻出相应直径和深度的孔。钻孔深度一般应大于钢筋直径的10倍,并符合设计要求。
植筋胶的使用方法主要包括以下步骤: 钻孔与清洁: 在基材上按照现场情况钻孔。 使用毛刷或专业清理机清除孔内灰尘,确保孔内干净无尘。 钢筋预处理: 用酒精擦拭钢筋表面,做好除锈工作,以保证钢筋与植筋胶的粘结更加紧密。
植筋胶的施工方法主要包括以下步骤:准备植筋粘结材料:根据施工要求选择合适的有机或无机植筋粘结材料。根据所选材料的特点,采用分管装式、机械注入式或现场配制式进行配胶。定位放线及钻孔:在构件植筋部位进行定位放线,确保钻孔位置的准确性。